LC-MS在生物制藥分析新趨勢 - HCPs殘留的分析

HCPs監測是生物藥生產(chǎn)過(guò)程中的關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CQA），需要在開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程中對其存在進(jìn)行監測、控制和記錄。而選擇合適的方法與可靠的試劑也十分關(guān)鍵。LC-MS方法分析HCPs的使用可以彌補HCP-ELISA方法的不足，如識別和量化單個(gè)HCP的能力，無(wú)需依賴(lài)抗HCP抗體。因此，該方法的應用及相應的監管要求在未來(lái)可能會(huì )增加。

LC-MS方法對生物藥物開(kāi)發(fā)有諸多好處

1. 可確定原液中HCP，并比較GMP生產(chǎn)條件下的批間差異；

2. 可鑒定對患者安全和產(chǎn)品穩定性有潛在影響的特定種類(lèi)HCPs；

3. 可用于評價(jià)純化過(guò)程中去除特定HCP的效果，例如高豐度的HCPs和潛在風(fēng)險因子HCPs。

每個(gè)純化步驟后的HCP譜可以起到控制雜質(zhì)清除的目的，并證明生產(chǎn)的一致性和穩健性。此外，LC-MS可以用于復雜生物藥物的蛋白雜質(zhì)分析，如病*疫苗和基因治療產(chǎn)品。這類(lèi)產(chǎn)品的工藝相關(guān)雜質(zhì)來(lái)自多種生物體以及其他多種來(lái)源，包括人源細胞系、重組血清白蛋白、核*酶，以及制造過(guò)程中使用的其他酶等。

2017 年以來(lái)，有多家生物制藥公司已通過(guò)LC-MS方法分析各種蛋白質(zhì)生物藥物中的HCP，包括單克隆抗體、疫苗和其他生物制劑。不同的品牌儀器，不同的數據庫軟件，不同的量化方法都能得到可靠的分析結果。

當選擇LC-MS作為生物制藥HCP分析方法時(shí)，無(wú)論是定量方法還是定性方法，都有必要進(jìn)行適用性驗證。LC-MS方法分析HCP比較復雜，重現性非常重要。該方法由多個(gè)步驟組成，包括：蛋白變性、還原、烷基化、胰酶消化為肽段，肽段通過(guò)HPLC柱分離，并通過(guò)MS進(jìn)行分析。樣品可能被消化為數千個(gè)肽段，產(chǎn)生數千張MS圖譜。因此，整合及在過(guò)程中建立內部控制品（QC）就至關(guān)重要，重復性和靈敏度也是質(zhì)譜系統至關(guān)重要的參數。