質(zhì)譜是怎么做到定量分析的？

質(zhì)譜的定量和紫外檢測器，蒸發(fā)光檢測器沒(méi)什么本質(zhì)區別，只不過(guò)質(zhì)譜的線(xiàn)性范圍比較令人抓狂而已。當然還有一系列的問(wèn)題，比如說(shuō)特別是很多生物分析的樣品，你稀釋十倍之后很可能質(zhì)譜信號的強度不會(huì )下降十倍。1ppm對應的離子計數為一萬(wàn)，0.1ppm對應的離子計數不是一千而很可能是五千三千。

質(zhì)譜信號強度與待分析物含量的關(guān)系

任何定量分析方法都需要建立實(shí)驗測量信號與待分析物的量的關(guān)系。很幸運的是，在質(zhì)譜中，通常也可以建立這樣的關(guān)系，因此質(zhì)譜信號是可以用于定量的。從題主的說(shuō)明來(lái)看，Ta的疑惑主要在這里。既然問(wèn)題是“質(zhì)譜是怎樣做到定量的？"，我們不妨把質(zhì)譜信號的產(chǎn)生按時(shí)間順序粗略分為三個(gè)步驟，即離子的產(chǎn)生，傳輸與檢測。

1. 產(chǎn)生離子時(shí)，不同樣品分子的電離通常是相互獨立的。因此樣品量越多，其產(chǎn)生的離子也就越多。目前常用的各種離子化方法（EI、ICP、ESI、MALDI等）在實(shí)驗中（嚴格來(lái)說(shuō)僅在一定濃度范圍內——術(shù)語(yǔ)是動(dòng)態(tài)范圍，dynamic range）都至少滿(mǎn)足樣品量與產(chǎn)生離子量的正相關(guān)，一般情況下也可以進(jìn)一步近似成線(xiàn)性相關(guān)。

2. 傳輸離子時(shí)，簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)可以認為傳輸效率與被傳輸離子的量無(wú)關(guān)；（嚴格地說(shuō)，被傳輸的離子太多時(shí)，相同電荷的互相排斥會(huì )造成離子束的“體積"變大，導致傳輸效率下降。這種影響在空間有限的離子阱中表現得更加明顯，因此在離子阱質(zhì)譜中一個(gè)重要的技術(shù)就是適當控制進(jìn)入儀器的離子數量，使其既不太少也不太多。）

3. 檢測離子時(shí)，不論是使用光電倍增管的檢測器，還是檢測鏡像電流的檢測器（ICR/Oribtrap），其信號強度（在一定范圍內）均與離子數量大致線(xiàn)性相關(guān)。

廢話(huà)幾句，可能會(huì )使題主感覺(jué)質(zhì)譜不能定量的原因之一是，我們看到的質(zhì)譜圖常用相對強度作為縱坐標，即0-100%強峰，而不展示信號的絕對強度。但在做質(zhì)譜的時(shí)候，儀器記錄的當然是絕對強度（相對強度也是通過(guò)絕對強度換算出來(lái)的）。我們需要用絕對強度來(lái)定量時(shí)，就需要這部分平時(shí)不?？吹男畔⒘?。

另外，在談到色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法時(shí)，待分析物與實(shí)驗測量信號的關(guān)系之中又多了一層色譜，即待分析物含量->色譜流出物中樣品含量->質(zhì)譜信號。與EI譜圖分析以相對強度為主不同，在色譜-質(zhì)譜聯(lián)用時(shí)，信號的絕對強度就成了我們天天都要關(guān)心的內容，因為質(zhì)譜信號強度隨時(shí)間的變化就是實(shí)驗的色譜圖，通常以總離子強度或者某一特定質(zhì)荷比離子的強度作圖。